한국콩연구회

바실러스 균주가 생산하는 항돌연변이성 색소의 정제방법

Method for refining novel pigment produced by Bacillus species

IPC 코드 : C12P 1/04

출원번호 : 1019990057685 (1999.12.14)

공개번호 : 1020010056295 (2001.07.04)

등록번호 : 100371387 (2003.01.23)

출원인 : 김종규 | 김영식

발명자/고안자 : 김종규 | 김영식

대표청구항

바실러스 균주(Bacillus licheniformis SSA3)가 생산하는 색소의 정제방법에 있어서,

(a) 바실러스 균주(Bacillus licheniformis SSA3)를 배양한 후, 원심분리하여 배양액을 수득하는 단계; 

(b) 상기 배양액을 음이온 컬럼 크로마토그래피를 통과시켜 음이온성 물질들을 제거한 유출액을 다시 양이온 컬럼 크로마토그래피를 통과시켜 색소를 흡착시키는 단계;

(c) 상기 흡착된 색소를 NH 

4 OH로 용출시키고 감압농축 및 건조시켜 건조된 조색소(TCP)를 수득하는 단계;

(d) 상기 건조된 조색소(TCP)를 메탄올에 용해시켜 메탄올에 용해된 조색소 상등액(TMS)을 수득하여 감압농축 및 건조시키는 단계; 및 

(e) 상기 건조 TMS를 증류수에 용해시킨 후 이동상(n-프로판올 : 25% NH 

4 OH : 물 : 6 : 3 : 1)을 사용하여 HPLC로 2차 및 3차 통과시켜 단계마다 항돌연변이성 단일 색소화합물을 정제하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 바실러스 균주가 생산하는 항돌연변이성 색소의 정제방법.

청구항

청구항 1항

바실러스 균주(Bacillus licheniformis SSA3)가 생산하는 색소의 정제방법에 있어서,

(a) 바실러스 균주(Bacillus licheniformis SSA3)를 배양한 후, 원심분리하여 배양액을 수득하는 단계; 

(b) 상기 배양액을 음이온 컬럼 크로마토그래피를 통과시켜 음이온성 물질들을 제거한 유출액을 다시 양이온 컬럼 크로마토그래피를 통과시켜 색소를 흡착시키는 단계; 

(c) 상기 흡착된 색소를 NH 

4 OH로 용출시키고 감압농축 및 건조시켜 건조된 조색소(TCP)를 수득하는 단계;

(d) 상기 건조된 조색소(TCP)를 메탄올에 용해시켜 메탄올에 용해된 조색소 상등액(TMS)을 수득하여 감압농축 및 건조시키는 단계; 및 

(e) 상기 건조 TMS를 증류수에 용해시킨 후 이동상(n-프로판올 : 25% NH 

4 OH : 물 : 6 : 3 : 1)을 사용하여 HPLC로 2차 및 3차 통과시켜 단계마다 항돌연변이성 단일 색소화합물을 정제하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 바실러스 균주가 생산하는 항돌연변이성 색소의 정제방법.

청구항 2항

바실러스 균주(Bacillus licheniformis SSA3)가 생산하는 색소의 정제방법에 있어서,

(a) 바실러스 균주(Bacillus licheniformis SSA3)를 배양한 후, 원심분리하여 배양액을 수득하는 단계;

(b) 상기 배양액을 음이온 컬럼 크로마토그래피를 통과시켜 음이온성 물질들을 제거한 유출액을 다시 양이온 컬럼 크로마토그래피를 통과시켜 색소를 흡착시키는 단계;

(c) 상기 흡착된 색소를 NH

4 OH로 용출시키고 감압농축 및 건조시켜 건조된 조색소(TCP)를 수득하는 단계;

(d) 상기 건조된 조색소(TCP)를 메탄올에 용해시켜 메탄올에 용해되지 않은 조색소 침전물(TMI)을 수득하여 감압농축 및 건조시키는 단계; 및

(e) 상기 건조 TMI를 증류수에 용해시킨 후 이동상(n-프로판올 : 25% NH

4 OH : 물 : 6 : 3 : 1)을 사용하여 HPLC로 2차 및 3차 통과시켜 단계마다 항돌연변이성 단일 색소화합물을 정제하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 바실러스 균주가 생산하는 항돌연변이성 색소의 정제방법.

청구항 3항

삭제

청구항 4항

삭제

요약

본 발명은 전통 장류에 존재하는 바실러스 속 균주(Bacillus sp. SSA3)가 생산하는 신규한 색소의 정제와 이의 이용에 관한 것이다.

Bacillus

sp. SSA3 배양물에서 분리한 신규 색소를 원심 분리, 이온 교환수지, HPLC 및 메탄올에 대한 용해성에 특징이 있는 색소의 정제방법에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 메탄올에 용해되는 색소(TMS)와 메탄올에 용해되지 않는 색소를 포함하는 것을 특징으로 한다. 상기의 방법으로 3TMS-2, 2TMS-3, 3TMI-2 및 2TMI-3 4종의 신규한 색소를 정제하였다. 전통 장류에서 생성되는 상기 정제된 색소는 항돌연변이성 및 세포 내에서의 항산화성, 항암성 및 암세포 성장 억제능을 제공하는 기능성 색소에 해당된다. 아울러, 상기 정제된 색소는 기능성 식품으로서의 섭취 및 항돌연변이성 의약품으로서의 투여 시 인체에 무해함을 시사하여 식품 및 의약품으로의 소재로 제공된다.