한국콩연구회

유전자변형식품 검사용 표준플라스미드 비교 검증 연구

Comparison and verification study of standard plasmids for detecting genetically modified food

주관연구기관 : 경희대학교

연구책임자 : 김해영

발행년월 : 2016-05

주관부처 : 식품의약품안전평가원

원문

http://www.ndsl.kr/ndsl/search/detail/report/reportSearchResultDetail.do?cn=TRKO201600010295

초록

본 연구에서는 유전자변형식품 분석시 시험대조물질로써 표준시료(CRM)와 14162미래식122 용역과제에서 개발한 표준플라스미드를 사용했을 때 결과 값의 차이가 있는지 검증하였다. 또한, 상업화된 CRM 현황 및 시험대조물질 개발 현황이 조사되었다. 두 가지 시험대조물질의 비교 및 검증을 위해 GM 콩 3종(RRS, DP-305423-1, DP-356043-5), GM 옥수수 3종 (MIR604. DAS-59122-7, DP098140-6)을 구입하여 각각에 대한 정성, 정량분석이 실시되었다. 유전자변형 콩 3종에 대한 정성분석에서 CRMs에 교차오염이 있음을 확인하였다. 표준플라스미드를 시험대조물질로 이용한 정성분석의 검정한계치는 각각의 GM 콩 events에 대해 모두 10 copies까지 확인되었고, CRM를 시험대조물질로 사용한 정성분석의 검정한계치는 RRS에 대해서 200 copies, DP-305423-1 와 DP-356043-5 CRM에 대해서 5 copies로 확인되었다. 정량분석 시 표준플라스미드를 시험대조물질로써 사용했을 때 보정계수가(Conversion factor, Cf)가 필요하다. 이것은 내재유전자와 외래유전자의 copy수의 비율을 %함량으로 변환시켜주는 계수이다. 모든 정량분석은 3well에 동일한 시료를 넣고 3반복을 통해 실시되었다. 유전자 변형 콩 3종에 대한 정량분석에서 RRS의 경우 0.97, DP-305423-1는 0.99, DP-356043-5는 0.94의 값을 얻었다. 유전자변형 옥수수 3종에 대한 정성분석에서 CRMs에 교차오염은 없는 것으로 확인되었다. 표준플라스미드를 시험대조물질로 이용한 정성분석의 검정한계치는 MIR604와 DAS-59122-7은 5 copies, DP098140-6은 1 copy까지 확인되었고, CRM를 시험대조물질로 사용한 정성분석의 검정한계치는 MIR604와 DP098140-6에 대해서 5 copies, DAS-59122-7에 대해서 10 copies로 확인되었다. 정량분석 결과, 보정계수는(Cf)는 MIR604의 경우 0.42, DAS-59122-7의 경우 0.59, DP098140-6의 경우 0.97을 얻었다. 결론적으로, 유전자변형식품 검사법에 시험대조물질로써 표준시료를 표준플라스미드로 대체하여도 정성, 정량시험 결과 값의 차이가 없을 것으로 판단된다.